免疫磁珠分选兔前软骨干细胞及细胞研究平台的建立

[目的]研究兔前软骨干细胞PSCs,(precartilagious stem cells)的分离、培养方法及增殖、表型特征,为细胞移植治疗椎间盘退变,提供合适的种子细胞.[方法]取胎兔骨骺周围软骨膜(LaCroix环)中的细胞进行原代培养,然后采用免疫磁珠分离系统分选纯化PSCs.体外培养,传代,冻存复苏,绘制生长曲线,观察细胞特性.分别采用免疫组化、免疫荧光、RT-PCR等方法鉴定纯化后的PSCs.[结果]免疫磁珠分离可获得纯度较高的兔PSCs,培养后成活率高,细胞状态良好.细胞冻存复苏后,细胞增殖速度、细胞形态及表面标志物无明显变化.免疫组化、免疫荧光、RT-PCR等方法鉴定后,细胞都有明显的PSCs表面特异性标记物的表达.[结论]PSCs存在于LaCroix环中,免疫磁珠分离法得到的PSCs,体外培养条件下,细胞增殖较快,生物学特性稳定.     

诱导骨髓基质细胞表达神经细胞标记物Nestin,NSE和GFAP:脑源性神经节苷脂定向诱导细胞分化作用的研究

目的：研究脑源性神经节苷脂诱导成年大鼠骨髓基质细胞定向分化为神经前体细胞的作用。方法：成年大鼠骨髓基质细胞传代纯化后，分别在无血清、无外源性生长因子、含2％t327的Neurobasal-A培养基及含20％胎牛血清的DMEM培养基中添加脑源性神经节苷脂作为诱导物，观察细胞的形态变化。结果：在无血清、无外源性生长因子、含2?7的Neurobasal-A培养基中，脑源性神经节苷脂能诱导骨髓基质细胞定向分化为神经前体细胞，其形态发生显著变化，胞体逐渐变小、折光性增强，突起逐渐增多、延长，部分细胞间可见突起连接、细胞核和核仁；诱导第5d免疫细胞荧光染色显示，神经前体细胞标记物Nestin染色阳性，同时部分细胞可见神经元特异性标记物NSE及星形胶质细胞标记物GFAP染色阳性，而少突胶质细胞标记物Nogo-A染色阴性。在含20％胎牛血清的DMEM（高糖）培养基中，脑源性神经节苷脂的这种诱导、分化作用明显被抑制，表现为细胞形态变化不明显，Nestin、NSE及GFAP染色均为阴性。两组对照组细胞形态无变化、上述染色均为阴性。结论：脑源性神经节苷脂具有诱导骨髓基质细胞成为神经前体细胞的作用，这种作用不需要外源性生长因子存在，血清可抑制这种作用，脑源性神经节苷脂在成体干细胞可塑性研究中有重要价值。     

血清胆碱酯酶浓度联合APACHEⅡ评分对脓毒症病人预后的评估价值

目的探讨并比较有脓毒症病人人院24小时内急性生理学及慢性健康状况评估Ⅱ（APACHE11）评分和胆碱酯酶（Cholinesterase,ChE）浓度改变在预测病情及预后中的价值。方法对60例人院24小时内的脓毒症病人进行APACHEⅡ评分;同时测定ChE浓度．病人预后分为存活组和死亡组．分析ChE和APACHEII评分与病情及预后关系。结果存活组APACHEⅡ分明显低于死亡组（P〈O．01）,而ChE浓度明显高于死亡组（P〈0．01）。随着APACHEⅡ评分升高而ChE降低,且死亡率上升。2项指标与预后的Logistic回归分析均有显著性意义（P〈0．01）,APACHEⅡ评分（OR95％CI=0．7445～0．9147）,ChE浓度（0R95％CI=1．0005～1．0018）。APACHEII评分和ChE与预后的ROC曲线下面积（AUC）分别是0．828和0．818,提示两者在预测脓毒症病人预后时均具有一定的价值,但两者没有显著性差异（p〉0．05）,而两者联合预测时AUC为0．952,预测的准确性大于其中任何一项单一预测（P〈0．05）。结论APACHEⅡ评分和ChE浓度的改变对急性重症胆管炎病人病情及预后有重要的相关性,两者联合可明显提高对预后判断的准确性,为临床救治提供一定的指导。     

血管内皮生长因子、血小板反应素1在肾上腺皮质肿瘤中的表达及其意义

目的讨论血管内皮生长因子（VEGF）与血小板反应素1（TSP-1）在肾上腺皮质肿瘤中的表达及其临床意义。方法选取经手术治疗且取得完整临床资料的肾上腺皮质肿瘤石蜡包埋标本37例,其中良性组20例,恶性组（ACC组）17例。采用免疫组化技术,检测并分析良、恶性肾上腺皮质肿瘤中VEGF和TSP-1的表达情况。结果TSP-1在ACC组中呈低表达（5／17,29．41％）,在良性组中表达高（13／20,65．00％）,ACC组与良性组之间TSP-1的表达有显著性差异（P〈0．05）。VEGF在ACC组中呈高表达（70．59％）,在良性组中表达较低（25．00％）,VEGF在ACC组中的表达与在良性组中的表达有显著性差异（P〈0．05）。微血管密度（MVD）在ACC组中的表达为（76．40±15．64）／视野,良性组中为（21．05±8．07）／视野,两者之间有显著性差异（P〈0．05）。VEGF的表达和MVD呈正相关（P〈0．01）,TSP-1的表达和MVD呈负相关（P〈0．01）。VEGF的表达和TSP-1的表达呈负相关（rs＇=-0．386）。结论VEGF与TSP-1表达不平衡可能是肾上腺皮质肿瘤肿瘤性血管生成的重要原因,有望为抗肿瘤靶向治疗在ACC中的应用提供相应的理论依据。     

Development of CAR T Cells Expressing a Suicide Gene Plus a Chimeric Antigen Receptor Targeting Signaling Lymphocytic-Activation Molecule F7

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Mitochondrial function and dynamics in neural stem cells and neurogenesis: Implications for neurodegenerative diseases

Mitochondria have been largely described as the powerhouse of the cell and recent findings demonstrate that this organelle is fundamental for neurogenesis. The mechanisms underlying neural stem cells (NSCs) maintenance and differentiation are highly regulated by both intrinsic and extrinsic factors. Mitochondrial-mediated switch from glycolysis to oxidative phosphorylation, accompanied by mitochondrial remodeling and dynamics are vital to NSCs fate. Deregulation of mitochondrial proteins, mitochondrial DNA, function, fission/fusion and metabolism underly several neurodegenerative diseases; data show that these impairments are already present in early developmental stages and NSC fate decisions. However, little is known about mitochondrial role in neurogenesis. In this Review, we describe the recent evidence covering mitochondrial role in neurogenesis, its impact in selected neurodegenerative diseases, for which aging is the major risk factor, and the recent advances in stem cell-based therapies that may alleviate neurodegenerative disorders-related neuronal deregulation through improvement of mitochondrial function and dynamics.     

Vasostatin,a Calreticulin Fragment,Inhibits Angiogenesis and Suppresses Tumor Growth

An endothelial cell inhibitor was purified from supernatant of an Epstein-Barr virus–immortalized cell line and identified as fragments of calreticulin. The purified recombinant NH₂-terminal domain of calreticulin (amino acids 1–180) inhibited the proliferation of endothelial cells, but not cells of other lineages, and suppressed angiogenesis in vivo. We have named this NH₂-terminal domain of calreticulin vasostatin. When inoculated into athymic mice, vasostatin significantly reduced growth of human Burkitt lymphoma and human colon carcinoma. Compared with other inhibitors of angiogenesis, vasostatin is a small, soluble, and stable molecule that is easy to produce and deliver. As an angiogenesis inhibitor that specifically targets proliferating endothelial cells, vasostatin has a unique potential for cancer treatment.     

三叶因子1在大鼠草酸钙结石模型肾组织中的表达及其意义

目的 探讨三叶因子1(TFF1)在大鼠草酸钙结石模型肾组织中的表达及其与肾脏草酸钙结石形成机制的关系.方法 分别以1％的乙二醇溶液自由饮用和2％的NH4Cl溶液2 mL/d灌胃2周和4周;用偏光显微镜观察结石结晶形成情况;采用免疫组织化学染色法分别检测成石2周(n=20)、成石4周(n=20)和正常组(n=20)大鼠肾组织TFF1蛋白的表达.结果 TFF1免疫反应阳性物质主要位于肾小球、肾小管,与正常组比较,成石2周肾组织TFF1平均灰度值略下降(P＞0.05),成石4周平均灰度值明显降低(P＜0.05).结论 乙二醇诱导的大鼠草酸钙结石模型肾组织中TFF1低表达,伴随结石结晶数量和密度的增加,TFF1表达降低.TFF1在肾组织中的表达与乙二醇和NH4Cl干预的时限呈负相关;TFF1可能在肾草酸钙结石的形成中起抑制作用.     

醋酸氯地孕酮治疗良性前列腺增生的疗效观察

【摘要】目的 探讨醋酸氯地孕酮治疗良性前列腺增生的临床疗效。方法 观察32例接受醋酸氯地孕酮(CMA)治疗的良性前列腺增生患者(50 mg/d, qd),治疗18周后,对比分析治疗前后前列腺体积、国际前列腺症状评分/生活质量评分(IPSS/QoL)、最大尿流率、勃起功能国际问卷(IIEF-5),并记录出现的不良事件。结果 用药18周后,患者前列腺体积、IPSS、PSS?鄄排尿期症状评分、IPSS-储尿期症状评分、生活质量评分、IIEF-5均较治疗前均明显下降(P<0.05);最大尿流率较治疗前均明显上升(P<0.05)。结论 醋酸氯地孕酮可较全面地缓解良性前列腺增生患者的症状,有利于患者生活质量的改善。